دراسة نظام الارقاء. اختبارات التخثر الأساسية تحديد زمن تخثر بلازما الدم

يعد التشخيص المختبري لاضطرابات الجهاز المرقئ من أكثر التشخيصات تكلفة في الممارسة المخبرية. يعد إجراء جميع الاختبارات الممكنة لتوضيح طبيعة الاضطرابات لجميع المرضى مهمة شبه مستحيلة. لذلك، من المهم للغاية متابعة مراحل الاختبار بناءً على البيانات السريرية والتاريخ الطبي للمريض. في المرحلة الأولى، لتوضيح اتجاه الاضطرابات، من الضروري إجراء اختبارات تعكس حالة أجزاء كاملة من نظام مرقئ. هناك مجموعة من اختبارات الفحص الموصى بها لتشخيص حالة نظام مرقئ:

• ايه بي تي تي (تنشيط وقت تجلط الدم الجزئي)
• زمن البروثرومبين (حسب السريع)
• زمن الثرومبين
• الفيبرينوجين

وقت تخثر الدم (BCT)
VSC هو مؤشر إرشادي لحالة سلسلة التخثر متعددة المراحل، ونتيجة لذلك ينتقل الفيبرينوجين القابل للذوبان إلى الفيبرين غير القابل للذوبان. يقوم هذا المؤشر بتقييم عملية التخثر ككل ولا يسمح بتحديد الآليات التي تؤدي إلى تعطيلها. ويشير CVV المختصرة إلى الحاجة إلى منع فرط تخثر الدم، والذي غالبا ما يهدد بتجلط الدم أو الجلطات الدموية.

يستخدم كاختبار فحص لتقييم سلسلة تخثر البلازما الذاتية، وتشخيص مضاد تخثر الذئبة، ومراقبة تأثير الهيبارين المضاد للتخثر. يعد اختبار APTT اختبارًا أكثر أهمية للكشف الأولي عن الأمراض من اختبار زمن البروثرومبين، لأنه يكتشف الهيموفيليا A وB الشائعة نسبيًا (نقص العاملين الثامن والتاسع، على التوالي) ووجود مضادات التخثر الذئبية.
امتحان أبت-L +لديه حساسية عالية بشكل خاص لمضادات التخثر الذئبة. في وجود VA في الدم، يتم تمديد وقت التخثر بمقدار 3-3.5 مرات.
امتحان أبت-L —ويتميز بخصوصية عالية لعوامل التخثر الداخلية والهيبارين وحساسية منخفضة لمضادات التخثر الذئبية، مما يجعل من الممكن التمييز بين الاضطرابات في سلسلة التخثر الداخلي حتى في مرحلة فحصها.

هو اختبار فحص يستخدم على نطاق واسع لتقييم حالة المسارات الخارجية والعامة لسلسلة التخثر من تخثر البلازما. تتراوح قيم PT الطبيعية للبالغين من 11 إلى 15 ثانية، ولحديثي الولادة - من 13 إلى 18 ثانية. تشير الزيادة في PV إلى وجود ميل إلى نقص تخثر الدم وقد تعتمد على أسباب فردية:

• قصور واحد أو أكثر من عوامل مجمع البروثرومبين ، والذي لوحظ في حالات اعتلالات التخثر الوراثية النادرة مثل نقص بروكونفرتين الدم (نقص العامل السابع) ونقص بروثرومبين الدم (نقص العامل الثاني) ؛
• نقص العامل X في الداء النشواني (الذي يمتصه الأميلويد) ونقص العامل الخامس والسابع في المتلازمة الكلوية (التي تفرز في البول)؛
• انخفاض تخليق عوامل البروثرومبين المعقدة في أمراض الكبد.
• الاعتلال المعوي وخلل التنسج المعوي مما يؤدي إلى نقص فيتامين ك.
• عند علاجه بمضادات فيتامين ك؛
• لمتلازمة مدينة دبي للإنترنت (استهلاك عوامل البروثرومبين المعقدة)؛
• لالتهاب البنكرياس المزمن وسرطان البنكرياس والمثانة.
• انخفاض مستوى الفيبرينوجين في الدم (حتى 1 جم / لتر أو أقل)؛
• لسرطان الدم الحاد والمزمن (بسبب تطور متلازمة مدينة دبي للإنترنت)؛
• عندما يرتفع مستوى مضاد الثرومبين أو مضاد الثرومبوبلاستين؛
• الأدوية (الستيرويدات الابتنائية، المضادات الحيوية، الأسبرين بجرعات عالية، المسهلات، الميثوتريكسيت، النياسين، الكينيدين، الكينين، مدرات البول الثيازيدية، تولبوتاميد).

يشير تقصير PV إلى وجود ميل نحو فرط تخثر الدم ويمكن ملاحظته في المراحل الأولية من تجلط الأوردة العميقة في الأطراف السفلية، مع كثرة الحمر، وفي الأشهر الأخيرة من الحمل.

السيطرة على العلاج المضاد للتخثر
يلعب تحديد PT دورًا رائدًا في مراقبة العلاج بمضادات التخثر غير المباشرة. يتم التعبير عن نتائج البحث تقليديًا بالثواني. عند تحديد PT، يتم استخدام منشط تخثر الدم، الثرومبوبلاستين. إذا استخدم المختبر (المختبرات) أحد الثرومبوبلاستين اليوم وآخر غدًا، فستختلف درجة حرارة المريض من يوم لآخر. من أجل استبعاد تأثير الثرومبوبلاستين على نتائج تحديد PT، يتم استخدام مؤشر - النسبة الدولية المعيارية لـ INR، والتي توفر القدرة على مقارنة النتائج التي تم الحصول عليها في مختبرات مختلفة ويضمن مراقبة أكثر دقة للعلاج بمضادات التخثر غير المباشرة. يتم حساب INR باستخدام الصيغة:

INR للمريض = [المريض PT (ثانية)/التحكم PT (ثانية)] مؤشر الحساسية الدولي

الهدف الرئيسي من المراقبة باستخدام مضادات التخثر غير المباشرة هو منع النزيف. يجب تعديل جرعة مضاد التخثر للحفاظ على INR عند المستوى المطلوب، اعتمادًا على سبب العلاج. في معظم المرضى، ينبغي الحفاظ على INR عند 2-3.0. يجب إجراء مراقبة INR كل 2-3 أسابيع.

ولرصد مستوى مضادات التخثر، وضعت منظمة الصحة العالمية التوصيات التالية:

الحالة السريرية
الوقاية من جلطات الأوردة العميقة الأولية والمتكررة والجلطات الدموية الرئوية	2,5 (2,0-3,0)
التحضير قبل الجراحة: التدخلات الجراحية في منطقة الورك	2,0 (2,0-3,0)
جميع العمليات الجراحية الأخرى	2,5 (1,5-2,5)
علاج تجلط الأوردة العميقة والجلطات الدموية الرئوية والوقاية من تجلط الدم الوريدي المتكرر.	3,0 (2,0-4,0)
الوقاية من الجلطات الدموية الشريانية، بما في ذلك في المرضى الذين يعانون من الصمامات الاصطناعية	3,5 (3,0-4,5)
عالي متوسط قصير	2,5 — 3,0 2,0 — 3,0 1,6 — 2,0

وهو ثالث أهم اختبار فحص أساسي. يصف الاختبار المرحلة الأخيرة من عملية التخثر - تحويل الفيبرينوجين إلى الفيبرين تحت تأثير الثرومبين، ويتأثر بتركيز الفيبرينوجين في البلازما ووجوده. منتجات تحلل الفيبرين (FDP).

التحديد الكمي باستخدام طريقة كلاوس هو الاختبار الأساسي لدراسة الإرقاء. يعد تكوين الفيبرين وتثبيته هو الخطوة الأخيرة في تكوين الخثرة، حيث يتم تحويل الفيبرينوجين القابل للذوبان إلى الفيبرين غير القابل للذوبان بفعل الثرومبين والعامل الثالث عشر.
في حالة تصلب الشرايين، هناك زيادة مطردة في مستويات الفيبرينوجين، وهو أمر يصعب تصحيحه بالأدوية. ونتيجة لذلك، يزداد خطر الإصابة بأمراض القلب والأوعية الدموية مع زيادة محتوى الفيبرينوجين الأولي في حدود 3.0-4.5 جم / لتر. وقد وجد أن الزيادة في مستوى الفيبرينوجين في بلازما الدم للمرضى الذين يعانون من أمراض القلب والأوعية الدموية تسبق تطور احتشاء عضلة القلب والسكتة الدماغية. العلاقة بين مستويات الفيبرينوجين وتطور هذه المضاعفات واضحة بشكل خاص لدى المرضى الصغار ومتوسطي العمر. تعد مستويات الفيبرينوجين الاختبار الأكثر حساسية للكشف عن المراحل غير المصحوبة بأعراض لمرض الأوعية الدموية الشريانية المحيطية.

اختبارات خاصة لتقييم إرقاء البلازما

يتم تصنيع العامل الثامن في الكبد والطحال والخلايا البطانية وخلايا الدم البيضاء والكلى ويشارك في المرحلة الأولى (تكوين البروثرومبيناز) من إرقاء البلازما. يلعب تحديد العامل الثامن دورًا حاسمًا في تشخيص الهيموفيليا أ.
يحدث تطور الهيموفيليا A بسبب نقص خلقي في العامل الثامن. وفي الوقت نفسه، لا يوجد العامل الثامن في دم المرضى (الهيموفيليا A) أو يكون في شكل أقل وظيفيًا، ولا يمكنه المشاركة في تخثر الدم (الهيموفيليا A+). يحدث الهيموفيليا A في 90-92% من المرضى، والهيموفيليا A+ يحدث في 8-10%. في المرضى الذين يعانون من الهيموفيليا، يتم تقليل محتوى F VIII:C في بلازما الدم بشكل حاد، ويكون تركيز VIII-vWF فيه ضمن الحدود الطبيعية. لذلك، فإن مدة النزيف في الهيموفيليا A تكون ضمن الحدود المعيارية، وتمتد في مرض فون ويلبراند.
الهيموفيليا أ هو مرض وراثي، ولكن في 20-30٪ من مرضى الهيموفيليا، لا يقدم التاريخ العائلي من جانب أقارب الأم أي معلومات. ولذلك فإن تحديد نشاط العامل الثامن له قيمة تشخيصية كبيرة. اعتمادًا على مستوى نشاط العامل الثامن، يتم تقسيم الأشكال السريرية التالية للهيموفيليا A: الشكل الشديد للغاية (نشاط العامل الثامن من 0 إلى 1٪)؛ شكل حاد (نشاط العامل الثامن من 1 إلى 2٪)؛ شدة معتدلة (نشاط العامل الثامن من 2 إلى 5٪)؛ شكل خفيف، أو الهيموفيليا تحت الهيموفيليا (نشاط العامل الثامن من 6 إلى 24٪).
حوالي ثلث حاملي الهيموفيليا A لديهم مستويات نشاط للعامل الثامن تتراوح بين 25 و49%. في المرضى الذين يعانون من أشكال خفيفة وحاملي الهيموفيليا A، يتم ملاحظة المظاهر السريرية للمرض فقط بعد الإصابات والتدخلات الجراحية. الحد الأدنى لمستوى مرقئ نشاط العامل الثامن في الدم للعمليات هو 25٪، مع انخفاض مستوى خطر الإصابة بنزيف ما بعد الجراحة مرتفع للغاية. الحد الأدنى لمستوى مرقئ نشاط العامل الثامن في الدم لوقف النزيف هو 15-20٪، مع محتوى أقل، من المستحيل إيقاف النزيف دون إعطاء العامل الثامن للمريض. في مرض فون ويلبراند، الحد الأدنى لمستوى نشاط العامل الثامن المرقئ لوقف النزيف وإجراء الجراحة هو 25%.
في متلازمة DIC، بدءًا من المرحلة الثانية، هناك انخفاض واضح في نشاط العامل الثامن بسبب اعتلال التخثر الناتج عن الاستهلاك. يمكن أن يؤدي مرض الكبد الحاد إلى انخفاض مستوى العامل الثامن في الدم. يتم تقليل محتوى العامل الثامن في مرض فون ويلبراند، وكذلك في وجود أجسام مضادة محددة للعامل الثامن. يزداد نشاط العامل الثامن بشكل ملحوظ بعد استئصال الطحال. في الممارسة السريرية، من المهم جدًا التمييز بين الهيموفيليا ومرض فون ويلبراند.

مؤشرات تجلط الدم في الهيموفيليا ومرض فون ويلبراند

فِهرِس	الهيموفيليا	مرض فون ويلبراند
وقت التخثر	تطول	معيار
مدة النزيف	معيار	تطول
تراكم الصفائح الدموية مع الريستوسيتين	معيار	مخفض
وقت البروثرومبين	معيار	معيار
ايه بي تي تي	تطول	معيار
زمن الثرومبين	معيار	معيار
الفيبرينوجين	معيار	معيار

العامل السابع (بروكونفيرتين، أو كونفيرتين)يشير إلى الجلوبيولين α2. يؤدي النقص الخلقي للعامل السابع إلى تطور أهبة النزف (مرض الإسكندر).
تحدث الأشكال المكتسبة من نقص بروكونفرتين الدم عند الرضع في الأيام الأولى من الحياة، في المرضى الذين يعانون من تلف الكبد، وكذلك نتيجة لعمل مضادات التخثر غير المباشرة. هناك انخفاض في نشاط البروكفرتين في بلازما الدم لدى المرضى الذين يعانون من التهاب الكبد الفيروسي، وتليف الكبد، والتهاب الكبد الكحولي الحاد، والتهاب الكبد المزمن المستمر. في المرضى الذين يعانون من تليف الكبد، هناك علاقة واضحة بين انخفاض مستويات البروكفرتين وشدة العملية. نظرًا لنصف عمره القصير، فإن انخفاض نشاط البروكفرتين هو أفضل علامة لتطور فشل الكبد.
الحد الأدنى لمستوى مرقئ نشاط العامل السابع في الدم للعمليات هو 10-20٪، مع انخفاض مستوى خطر الإصابة بنزيف ما بعد الجراحة مرتفع للغاية. الحد الأدنى لمستوى مرقئ نشاط العامل السابع في الدم لوقف النزيف هو 5-10٪؛ مع محتوى أقل، من المستحيل وقف النزيف دون إعطاء العامل السابع للمريض.
في متلازمة مدينة دبي للإنترنت، بدءًا من المرحلة الثانية، يتناقص نشاط العامل السابع بشكل واضح بسبب استهلاك اعتلال التخثر.

(عامل تثبيت الفيبرين، الفيبريناز، عامل لاكي لوراند) يشير إلى البروتينات السكرية β2. يتم توريث نقص العامل الثالث عشر الخلقي بطريقة جسمية متنحية، في الغالب عند الذكور. أول علامة سريرية لنقص الفيبريناز في 80٪ من المرضى هي النزيف المطول (لأيام، وأحيانًا لأسابيع) من الجرح السري. يتجلى النزيف في النوع النقطي. حدوث نزيف في المخ. ويلاحظ بطء التئام الجروح، وغالبًا ما يتشكل فتق ما بعد الجراحة، وتلتئم الكسور بشكل سيء. تظل جميع المعلمات في مخطط التخثر، باستثناء الانخفاض في مستوى العامل الثالث عشر في البلازما، ضمن الحدود الطبيعية. تم الكشف عن نقص العامل الثالث عشر المكتسب في المرضى الذين يعانون من نقص فيتامين C، ومرض الإشعاع، وسرطان الدم، وتليف الكبد، والتهاب الكبد، والسرطان مع النقائل الكبدية، وسرطان الغدد الليمفاوية، ومتلازمة مدينة دبي للإنترنت، وأولئك الذين خضعوا لاستئصال الغدة الكظرية. بعد تناول مضادات التخثر غير المباشرة، يتناقص نشاطها. يرجع انخفاض العامل الثالث عشر في الدم في هذه الأمراض إلى انتهاك تخليقه أو استهلاكه في عملية متلازمة مدينة دبي للإنترنت.
يوصى بدراسة نشاط العامل الثالث عشر في الجروح والكسور طويلة الأمد والتي تعاني من ضعف الشفاء، لأنه في بعض الحالات قد تترافق هذه الظواهر مع نقص هذا العامل، لأن العامل الثالث عشر يحفز تطور الخلايا الليفية.
الحد الأدنى لمستوى مرقئ نشاط العامل الثالث عشر في الدم لوقف النزيف هو 1-2%، مع محتوى أقل، من المستحيل وقف النزيف دون إعطاء العامل الثالث عشر للمريض.
في المرضى الذين يعانون من مضاعفات الانصمام الخثاري، تصلب الشرايين، بعد التدخلات الجراحية، في النساء في المخاض، بعد تناول الأدرينالين، الجلايكورتيكويدات، بيتويترين، نشاط الفيبريناز غالبا ما يزيد.

مقاومة العامل الخامس للبروتين المنشط C. هناك عدد من حالات التخثر الجديدة غير المعروفة مؤخرًا ولكنها منتشرة على نطاق واسع تشمل حالة ناجمة عن مقاومة العامل الخامس للبروتين المنشط C. المقاومة الوراثية للبروتين المنشط C (RAPS) هي السبب الأكثر شيوعًا لحالات التخثر الأولية. بين المرضى الذين يعانون من تجلط الدم، يحدث هذا المرض في 30-60٪، وبين السكان الأصحاء سريريا - في 10-15٪. يحدث RAPS في 90٪ من الحالات بسبب طفرة نقطية في جين العامل V. ويتسبب في استبدال الأرجينين في جزيء العامل V بالجليسين في الموضع 506، الموقع الرئيسي لعمل البروتين المنشط C (APC). نتيجة هذا الشذوذ هي حساسية منخفضة، أي مقاومة العامل Va (العامل V Leiden) لتعطيل APS الخاص به. عندما يتم الحفاظ على النشاط المحفز للتخثر للعامل Va، فإن هذا يؤدي إلى توليد الثرومبين وحالة التخثر. وفقا للمظاهر السريرية، RAPS هو أكثر حميدة من النقص الخلقي ، بروتين جوبروتين س. تشمل عوامل الخطر السريرية الأكثر أهمية للتخثر في RAPS الجراحة والحمل واستخدام وسائل منع الحمل عن طريق الفم. لقد ثبت أن حوالي 30٪ من حالات تجلط الدم بعد العملية الجراحية ناتجة عن RAPS. خلال فترة الحمل، يمكن أن يظهر RAPS على شكل تجلط في أوعية المشيمة وموت الجنين داخل الرحم. النساء اللاتي لديهن طفرة ليدن ويستخدمن وسائل منع الحمل عن طريق الفم لديهن خطر متزايد للإصابة بتجلط الدم بمقدار 30 مرة. تشير نتائج الدراسات الوبائية إلى وجود مزيج متكرر من RAPS مع نقص وراثي أو مكتسب في البروتين S أو البروتين C. ومن الواضح أنه مع مثل هذه العيوب مجتمعة يزداد خطر الإصابة بتجلط الدم. من المهم بشكل أساسي أن ارتفاع معدل انتشار RAPS في عموم السكان يفرض الحاجة إلى الاختبارات المعملية لهذه الحالة المرضية، ليس فقط في المرضى الذين يعانون من تجلط الدم، ولكن أيضًا في الأفراد الذين لا يعانون من أعراض والمعرضين لخطر كبير للإصابة بتجلط الدم. إذا كان العامل الخامس مقاومًا للبروتين C المنشط، فسيكون مؤشر APS أقل من الحد الأدنى الطبيعي. لتأكيد نتائج الاختبارات الوظيفية، تم تطوير العديد من الطرق المعتمدة على تفاعل البوليميراز المتسلسل لتشخيص مقاومة العامل Va للبروتين المنشط C.

تشمل طرق دراسة نظام تخثر الدم المجموعات التالية:

1. إرشادي (عام)، يعطي فكرة عن حالة سلسلة التخثر بأكملها ككل ومراحلها الفردية (يمكن إجراء التسجيل بصريًا أو باستخدام أجهزة منفصلة - جهاز تخطيط التخثر، جهاز تخطيط التجلط الدموي، وما إلى ذلك)؛
2. التمييز بين نقص العوامل الفردية - اختبارات التخثر التصحيحية، واختبارات خلط بلازما الدم المدروسة مع بلازما الدم للمرضى الذين يعانون من نقص معروف في بعض العوامل؛
3. التحديد الكمي للمكونات الفردية للنظام من خلال نشاطها الوظيفي (اختبارات التخثر، والدراسات على المواد اللونية وغيرها من الركائز) و (أو) بواسطة العلامات المناعية؛
4. تحديد التنشيط داخل الأوعية الدموية لعملية تخثر الدم وانحلال الفيبرين عن طريق العلامات الوظيفية أو العلامات الجزيئية لهذا التنشيط - تحديد الدورة الدموية لعوامل التخثر المنشطة ومنتجات تحلل الصفائح الدموية وانهيار مكونات نظام تخثر الدم أو مستقلباتها وظهور عوامل تخثر جديدة. تعمل العلامات المستضدية للعوامل المنشطة ومجمعاتها على تسريع عملية التمثيل الغذائي للمكونات المميزة لنظام تخثر الدم (تقليل عمر النصف في الدورة الدموية).

وبالتالي، عند تقييم حالة نظام تخثر الدم، يتم استخدامها ك تقنيات التخثر(المختبرية والأدواتية)، والتي تشكل أساس عملية التشخيص، و المناعية والنويدات المشعة وأنواع أخرى من البحوث. علاوة على ذلك، في كثير من الحالات، يمكن تحديد مكونات النظام من خلال النشاط الوظيفي ومناعيًا - من خلال محتوى المستضد المقابل في الدم. الاستخدام الموازي لهذه التقنيات يجعل من الممكن التمييز بين أشكال الأمراض المرتبطة بنقص تخليق عامل التخثر المقابل (في هذه الحالة، يتم تقليل نشاطه الوظيفي وكمية المستضد بالتساوي)، والأشكال التي يكون فيها العامل يتم تصنيع الجزيء، ولكنه غير طبيعي ومعيب وظيفيا.

لتعيين النماذج الأولى، تتم إضافة علامة "-" إلى رقم العامل المقابل (على سبيل المثال، VIII-، IX-، وما إلى ذلك)، وفي الثانية - علامة "+" (على سبيل المثال، VIII+، التاسع +).

اختبارات التخثر الإرشادية (العامة).

تحديد زمن تخثر الدم

تحديد زمن تخثر الدم(يفضل طريقة Lee-White) هو اختبار إرشادي سريع وطويل الأمد (مباشرة بجانب سرير المريض) يسمح بتحديد اضطرابات تخثر الدم الهامة المرتبطة بنقص عوامل تخثر الدم (باستثناء العامل السابع) أو بعمل مضادات التخثر وتحلل الفيبرين. يستخدم كاختبار إرشادي ومراقبة العلاج بالهيبارين، حيث يزيل تأثير الهيبارين مع كبريتات البروتامين. الاختبار منخفض الحساسية نسبيًا، ولا تنتهك مؤشراته إلا مع انخفاض واضح في محتوى عوامل التخثر في البلازما (أقل من 4-5٪)، وبالتالي فهو غير مناسب لتحديد الأشكال الخفيفة من الهيموفيليا A وB أيضًا. مثل اضطرابات تخثر الدم في الهيموفيليا الوعائية، ونقص العامل الحادي عشر، والبريكاليكرين وارتفاع الوزن الجزيئي للكينينوجين. لهذه الأسباب، لا يمكن استخدام الاختبار لفحص المرضى قبل الجراحة: مع قيم الاختبار الطبيعية (5-10 دقائق)، قد يحدث نزيف غزير بعد العملية الجراحية.

وقت إعادة حساب البلازما

وقت إعادة حساب البلازما هو اختبار غير قياسي ومنخفض الحساسية وأقل موثوقية للكشف عن نقص تخثر الدم من وقت تخثر الدم الكامل. لا يمكن التوصية به لتشخيص اضطرابات الإرقاء.

تنشيط زمن الثرومبوبلاستين الجزئي في البلازما

يعد زمن الثرومبوبلاستين الجزئي في البلازما المنشط (اختبار APTT، كاولين كيفالين) طريقة حساسة للغاية تكتشف اضطرابات تخثر الدم عندما تبدأ العملية بواسطة آلية داخلية. حساس بشكل انتقائي لنقص عوامل تخثر البلازما (حيث يتم تعويض نقص الصفائح الدموية وعامل الصفائح الدموية 3 عن طريق السيفالين أو الإريثروفوسفاتيد المعطى خارجيًا).

يستخدم لمراقبة علاج الهيبارين والفحص قبل الجراحة للمرضى وما إلى ذلك. تعتمد المؤشرات القياسية على عينات السيفالين المستخدمة، وفي معظم الحالات تكون 37-50 ثانية (الأمثل - 37-45 ثانية).

زمن بلازما الكاولين

زمن الكاولين في البلازما هو اختبار مشابه للاختبار السابق، ولكن دون إضافة السيفالين (الإريثروفسفاتيد) إلى البلازما، ونتيجة لذلك فهو حساس ليس فقط لنقص عوامل تخثر البلازما، ولكن أيضًا لنقص الصفائح الدموية. وعامل الصفائح الدموية 3. يمكن إجراء تقييم تقريبي لنشاط هذا العامل من خلال مقارنة وقت الكاولين لبلازما موضوع الاختبار مع محتوى مرتفع ومنخفض من الصفائح الدموية (القاعدة هي 57-70 ثانية).

لا يُنصح باستخدام مكونات الفسفوليبيد التي تعطي وقت تخثر يبلغ 55 ثانية أو أكثر في APTT، لأن هذا يقلل بشكل حاد من دقة الاختبارات وإمكانية تكرار نتائجها، بما في ذلك التحديد الكمي للعاملين الثامن والتاسع.

وقت بلازما السيليكون

وقت بلازما السيليكون هو وقت إعادة حساب البلازما الذي يتم الحصول عليه في ظل ظروف تحويل الإبر والأنابيب والماصات إلى سيليكون، أي مع الحد الأدنى من تنشيط الاتصال. يكون الاختبار حساسًا لفرط تخثر الدم - التنشيط داخل الأوعية الدموية لمرحلة الاتصال الأولية (العاملان الثاني عشر والحادي عشر)، ومع ذلك، يتم تحديد هذا الاضطراب بشكل أكثر وضوحًا من خلال تحديد وقت تخثر السيليكون للدم الكامل (استنادًا إلى طريقة لي وايت أو تسجيل التجلط الدموي للدم الكامل). العملية في كوفيت السيليكون).

تعتمد المؤشرات القياسية على السيليكون المستخدم ويتم تحديدها من خلال فحص دم الأشخاص الأصحاء لكل عينة على حدة. عند اختيار السيليكون فإن الأفضل هو الذي يطيل زمن تخثر الدم (البلازما) إلى أقصى حد.

زمن البروثرومبين في البلازما (الثرومبوبلاستين).

يميز زمن بروثرومبين البلازما (الثرومبوبلاستين) (الوقت السريع، مؤشر البروثرومبين) معدل تخثر بلازما الدم المعاد تكلسها عندما تبدأ العملية بآلية خارجية، أي عند إضافة الثرومبوبلاستين من دماغ الإنسان (أو الأرنب).

نشاط الثرومبوبلاستينموحدة على عينات مختلطة من البلازما العادية (التحكم). في أغلب الأحيان، يتم استخدام الثرومبوبلاستين مع نشاط 12-18 ثانية (في تقنية كويك الكلاسيكية - 12-13 ثانية). كلما كان الثرومبوبلاستين أضعف، كلما زاد خطأ الطريقة.

مع وقت البروثرومبين الطبيعي في البلازما، يسمح لك الاختبار بتحديد النقص المعزول أو التراكمي لعوامل البروثرومبين المعقدة - VII وX وV وII، منها ثلاثة عوامل (VII وX وII) تعتمد على فيتامين K ويكون نشاطها يتم تقليله تحت تأثير مضادات التخثر غير المباشرة. في هذا الصدد، يعد اختبار البروثرومبين هو الاختبار الرئيسي عند مراقبة جرعات الكومارين (نيوديكومارين، أو بيلنتان، سينكومار، وما إلى ذلك) وأدوية أخرى من هذه المجموعة (فينيلين).

يظل زمن البروثرومبين طبيعيًا في حالة نقص عوامل الآلية الداخلية لتنشيط البروثرومبيناز - العوامل XII وXI وIX وVIII (أي في جميع أنواع الهيموفيليا وعيوب هاجمان)، وكذلك في حالة نقص البريكاليكرين والوزن الجزيئي المرتفع كينينوجين (HM كينينوجين)

يتم قبول أشياء مختلفة في الأدب تعيين نتائج اختبار البروثرومبين. من الأنسب الإشارة إلى زمن البروثرومبين للاختبار والتحكم في بلازما الدم بالثواني (والذي يوفر أيضًا معلومات حول نشاط الثرومبوبلاستين المستخدم). وأحيانا يستخدمون نسبة هاتين الكميتين، أي المؤشر (PT لبلازما الاختبار، s)/(PT لبلازما التحكم، s)، (القاعدة 0.9-1.1).

شكل آخر لتقييم هذا المؤشر، والذي يستخدم على نطاق واسع في المختبرات، هو حساب مؤشر البروثرومبين كنسبة مئوية عن طريق رسم نسبة حسابية عكسية (القاعدة هي 90-110٪)، ومع ذلك، فإن مثل هذا الحساب غير صحيح، حيث أن هناك هو عدم الاتساق بين تركيز عوامل التخثر وحساب وقت التخثر، ولكن الاعتماد اللوغاريتمي. بالإضافة إلى ذلك، فإن اختبار البروثرومبين حساس فقط لانخفاض عوامل التخثر إلى أقل من 50% من قيمتها الطبيعية. وبسبب هذا، فمن المستحسن استخدام تحديد مؤشر البروثرومبين كنسبة مئوية وفقا لمنحنى التخفيف (1:2، 1:4، 1:8، الخ) لعينة مختلطة من البلازما الطبيعية. يتم إنشاء هذا المنحنى مرة واحدة للثرومبوبلاستينات ذات الأنشطة الأولية المختلفة (من 12 إلى 18 ثانية) ويتم تحديد مؤشر البروثرومبين في المرضى الذين تمت دراستهم منه. وتتمثل ميزة هذه التقنية أيضًا في أن نتائج جميع الدراسات، بما في ذلك تلك التي تم إجراؤها على مدار الوقت في أيام مختلفة، لا ترتبط بعينات عشوائية مختلفة من بلازما الدم الطبيعية، ولكن مع متوسط ​​نفس المعلمات القياسية، ونتيجة لذلك يتم تقليل الخطأ في الطريقة بشكل ملحوظ. المؤشرات التي تم الحصول عليها من النسبة ومن منحنى التخفيف للبلازما الطبيعية غير متسقة تمامًا مع بعضها البعض. وينبغي أيضا أن يؤخذ ذلك في الاعتبار عند مراقبة تأثير مضادات التخثر غير المباشرة، حيث أن الانخفاض في المؤشر المعتاد إلى 50٪ يتوافق تقريبا مع انخفاض في المؤشر على طول منحنى التخفيف إلى 25-30٪.وفي هذا الصدد، ينبغي إجراء التحليلات أشر دائمًا إلى كيفية حساب مؤشر البروثرومبين، وما هي مؤشراته المعيارية للثرومبوبلاستين لهذا النشاط.

زمن الثرومبين في البلازما

يعد زمن الثرومبين في البلازما، أي زمن تخثر البلازما السيترية عند إضافة الثرومبين القياسي للنشاط، هو الاختبار الرئيسي لتقييم المرحلة النهائية من تخثر الدم. أخذ هذا المؤشر في الاعتبار مهم للتفسير الصحيح لجميع اختبارات التخثر الأخرى، لأن انتهاك المرحلة النهائية من تخثر الدم يجب أن يؤدي حتما إلى تمديد وقت التخثر في جميع الطرق المذكورة أعلاه.

في معظم الحالات، عند إجراء اختبار الثرومبين، يتم استخدام تركيز محلول الثرومبين الذي يؤدي، عند مزجه مع حجم متساو من بلازما الدم، إلى تجلط الدم خلال 12-18 ثانية، ولكن عند التعرف على خلل الفيبرينوجين في الدم، يتم استخدام تركيزات أضعف أيضًا (مما يؤدي إلى تخثر الدم في 30-35 ثانية).

زمن الثرومبين- مؤشر تشخيصي مهم، ويلاحظ انتهاكه سواء في نقص بروثرومبين الدم الخلقي أو المكتسب (الثانوي)، في معظم خلل الفبرينوجين في الدم، وكذلك تحت تأثير الهيبارين ومنتجات انحلال الفيبرين (FDP) وعدد من مضادات الثرومبين الأخرى ومثبطات الذات - تجميع مونومرات الفيبرين. ولهذا السبب، يتم تعطيل زمن الثرومبين في المقام الأول وإلى حد كبير في متلازمات مدينة دبي للإنترنت الحادة وتحت الحادة، والتي تلعب دورًا مهمًا في التشخيص السريع لهذه الحالة المرضية.

اختبار التخثر الذاتي

اختبار التخثر الذاتي (ACT) هو اختبار حساس للغاية من مرحلتين يميز عملية تخثر الدم عندما يتم تحفيزها بواسطة آلية داخلية. مثل APTT، فإن الاختبار ليس حساسًا لنقص العامل السابع، ولكن في نفس الوقت لا تعتمد قراءاته على محتوى الفيبرينوجين (العامل الأول) في بلازما الدم التي يتم اختبارها، وهذا هو ما يختلف عن جميع اختبارات التخثر الإرشادية الأخرى. .

ميزة أخرى لـ ACT هي أنه يتم فحص الدم المخفف، مما يزيد بشكل كبير من حساسية الاختبار لنقص عوامل التخثر، وبالإضافة إلى ذلك، فإن إجراء ACT لا يتطلب استخدام الكاولين والسيفالين، حيث أن توحيد الاتصال وتفعيل الفوسفوليبيد في يتم تحقيقه عن طريق انحلال خلايا الدم الحمراء الخاصة بالمريض.

جوهر ACT هو إضافة 0.1 مل من دم المريض إلى 2 مل من محلول منخفض التوتر (0.222٪) من كلوريد الكالسيوم.

في خليط الهيموليزيت والكالسيوم، يتم تشكيل البروثرومبيناز والثرومبين، ويتم تحديد نشاطهما من خلال الإضافة المتتابعة لـ 0.2 مل من هذا الخليط إلى 0.2 مل من بلازما موضوع الاختبار (كل دقيقتين خلال الدقائق العشر الأولى، ثم كل 10 دقائق لمدة ساعة).

تعتبر بلازما الشخص مصدرًا للفيبرينوجين، حيث يتم اختبار نشاط الثرومبين المتكون في الخليط. وكما أظهرت العديد من الدراسات، يمكن استبداله ببلازما الدم من الأشخاص الأصحاء أو بمحلول الفيبرينوجين. في هذه الحالة، يتم تقليل استهلاك دم المريض إلى 0.1-0.2 مل (يمكن أخذه من الإصبع!) يحول اختبار التخثر الذاتي إلى اختبار التخثر الدقيق (MCT)ويجعله مناسبًا جدًا للاستخدام في طب الأطفال، بما في ذلك عند دراسة الإرقاء عند الأطفال حديثي الولادة.

نشاط التخثر في ACT وMCTيزداد في البداية وفي الأشخاص الأصحاء عادة ما يصل إلى الحد الأقصى بحلول الدقيقة العاشرة من حضانة خليط الدم والكالسيوم (BCM)، عندما يحدث تخثر بلازما الركيزة خلال 10 ± 1 ثانية. ثم يبدأ نشاط تخثر CCS في الانخفاض، مما يدل على تعطيل الثرومبين المتكون فيه. مع الهيموفيليا، عمل الهيبارين واضطرابات التخثر الأخرى، يتناقص نشاط التخثر لـ CCS بشكل حاد، ويتحرك الحد الأقصى من الدقيقة العاشرة إلى تاريخ لاحق. مع فرط تخثر الدم، لوحظ زيادة مبكرة وأكثر أهمية في نشاط الثرومبين في CCS.

عندما يتم إجراء الاختبار في أنبوب واحد (التحديد فقط في الدقيقة العاشرة من حضانة CCS)، يمكن استخدامه لمراقبة العلاج بالهيبارين. ميزة هذه التقنية مقارنة باختبار زمن الثرومبوبلاستين الجزئي المنشط هو أنها تحيد التأثير غير المتكافئ للسيفالينات المختلفة على زمن تخثر الهيبارين.

استناداً إلى ACT (MCT)، تم تطوير طريقة بسيطة ودقيقة للتشخيص التفريقي للهيموفيليا.

باستخدام جداول التحويل الواردة في الكتب المرجعية، يمكن التعبير عن قراءات ACT (MCT) كنسبة مئوية وتصويرها في شكل رسم بياني - مخطط تخثر تلقائي.

لتقييم عدد من المعايير العامة لتخثر الدم، يتم أيضًا استخدام طرق البحث الآلية على نطاق واسع، وذلك باستخدام العديد من أجهزة قياس التخثر والتخثر.

تصوير التجلطات الدمويةيعطي فكرة ليس فقط عن العوامل الزمنية لتخثر الدم أو البلازما، ولكن أيضًا عن البنية والخصائص الميكانيكية للجلطات الناتجة. في السنوات الأخيرة، تم إدخال توحيد الاتصال وتنشيط الفسفوليبيد لعملية التخثر في طرق تسجيل الأجهزة. يتم أيضًا إنشاء مخططات التخثر للأداء الشامل لاختبارات التخثر العامة - APTT والبروثرومبين والثرومبين وغيرها مع التسجيل التلقائي للنتائج.

طرق التمييز بين أوجه القصور في عوامل التخثر المختلفة وقياسها الكمي

توضح البيانات الواردة في الجدول أدناه أن الدراسة الإرشادية لتخثر الدم باستخدام ثلاثة اختبارات رئيسية تسمح بالتمييز الجماعي لنقص عوامل تخثر الدم في البلازما المختلفة. وبالتالي، فإن تباطؤ التخثر فقط في اختبار البروثرومبين (اضطراب النوع الأول) مع قراءات طبيعية لجميع الآخرين هو سمة من سمات نقص العامل الوراثي السابع أو انخفاض مستوى هذا العامل في المراحل المبكرة من تطور اليرقان الانسدادي أو في أول 1-2 أيام من العلاج بمضادات التخثر ذات التأثير غير المباشر، عندما يكون تخليق عامل التثبيط السابع متقدمًا في تطوير انخفاض في مستوى جميع عوامل التخثر الأخرى المعتمدة على فيتامين K.

أنواع انتهاكات اختبارات التخثر الرئيسية مع نقص بعض عوامل تخثر البلازما
نوع المخالفات		اختبارات التخثر
		أبتف، أكت
	عامل فون ويلبراند
	بريكاليكرين البلازما
	كينينوجين VM
	مضادات التخثر المباشرة (الهيبارين، الهيبارينويدات، الخ)
	مضادات التخثر غير المباشرة (الكومارين)
ملحوظة. (+) - تباطؤ تخثر الدم. (-) - غياب اضطراب تخثر الدم.

لوحظ انتهاك آلية التخثر الداخلية فقط، أي تنشيط وقت الثرومبوبلاستين الجزئي وACT (النوع الثاني)، مع نقص العوامل XII، XI، IX، VIII، von Willebrand (ليس في جميع الأشكال)، prekallikrein و UM kininogen. من بين هذه الحالات، مع عيوب التخثر الوراثية، يُلاحظ نقص العوامل الثاني عشر والبريكاليكرين وVM كينينوجين بشكل نادر جدًا ولا يصاحبه أي نزيف، في حين أن نقص العوامل الثامن (الهيموفيليا A) والتاسع (الهيموفيليا B) وعامل فون ويلبراند يكون شديدًا. شائع (أكثر من 96% من جميع أمراض التخثر الوراثية) ويصاحبه نزيف حاد. بينهما، أولا وقبل كل شيء، يتم إجراء المزيد من التشخيص التفريقي.

نقص العامل الحادي عشرنادر نسبيًا (حوالي 0.5-1.0٪ من جميع حالات الهيموفيليا)، ويحدث مع نزيف خفيف جدًا (بشكل رئيسي بعد الإصابات والعمليات) ويحتل مكانًا متوسطًا بين المجموعة الفرعية الأولى من الاضطرابات بدون أعراض ومرض الهيموفيليا ومرض فون ويلبراند.

هناك نوع آخر من الاضطراب يتميز بإطالة زمن الثرومبوبلاستين الجزئي وACT، وكذلك زمن البروثرومبين. وهو من سمات نقص العوامل V أو X أو II أو النقص المعقد لجميع العوامل المعتمدة على فيتامين K (VII، X، IX، II)، والذي يتم ملاحظته مع اليرقان الانسدادي وأنواع أخرى من نقص فيتامين K، كما وكذلك عند تناول مضادات التخثر غير المباشرة.

وأخيرًا، كما يتبين من نفس الجدول، من الممكن انتهاك قراءات جميع الاختبارات الثلاثة (النوع الرابع)، والتي يتم ملاحظتها مع نقص وخلل الفيبرينوجين في الدم الوراثي والمكتسب (ليس كل شيء)، عند تناول مضادات التخثر ذات التأثير المباشر (الهيبارين ، الهيبارينويدات ، الهيرودين ، إلخ.) ، العلاج بمنشطات انحلال الفيبرين وأدوية إزالة الرجفان (الستربتوكيناز ، اليوروكيناز ، إلخ) ، ظهور مضادات الثرومبين المرضية في الدم والمواد التي تمنع اتصال (تجميع) مونومرات الفيبرين - البروتينات، الكريوبولين، المجمعات المناعية، وكذلك في اضطرابات التخثر المعقدة الناجمة عن متلازمة مدينة دبي للإنترنت. في هذه الحالة، غالبًا ما يتم تعطيل وقت الثرومبين إلى حد أكبر وفي وقت أبكر إلى حد ما من الاختبارات الأخرى.

مع الأخذ في الاعتبار مدة المرض وإمكانية نشوئه الوراثي أو ارتباطه الثانوي بأنواع أخرى من الأمراض والتأثيرات الطبية أو غيرها، ووجود أو عدم وجود نزيف ونوعه، من الممكن تحديد نشأة هذه الأمراض العميقة بشكل صحيح. اضطرابات تخثر الدم.

الجميع تعتمد اختبارات التمايز على مبدأ التصحيح، أي عند تحديد إلى أي مدى يتم القضاء على اضطراب تخثر الدم المحدد أو، على العكس من ذلك، لا يتم القضاء عليه عن طريق عينات من بلازما الدم أو منتجات الدم التي يتم الحصول عليها بشكل مصطنع مع نقص معروف في عامل تخثر واحد أو آخر.

ولهذا الغرض، تقوم المختبرات المتخصصة بإنشاء مجموعات من بلازما الدم الناقصة للعامل لنفسها، حيث تستقبلها من المرضى الذين يعانون من نقص عميق معروف (أقل من 1٪) لكل عامل وتخزينها في عبوات صغيرة (0.5 مل) عند درجة حرارة - 30 درجة مئوية. إذا لزم الأمر، يتم إذابة هذه العينات واستخدامها في الاختبارات التشخيصية.

لا يمكن إعادة تجميد البلازما التي تم إذابة تجميدها عن طريق الخطأ أو تركها دون استخدام. في اختبارات التصحيح، لا ينبغي استخدام البلازما مع مثبطات المناعة لعامل معين. تحتوي مجموعات التشخيص من عدد من الشركات على عينات من بلازما الدم المجففة بالتجميد والتي تعاني من نقص عوامل التخثر التي يمكن اكتشافها (بلازما الركيزة). ومع ذلك، نادرا ما يتم ملاحظة العديد من اضطرابات التخثر في الممارسة السريرية، لذلك يتم استخدام مكونات الدم الطبيعية المعدة بشكل مصطنع مع نقص بعض عوامل التخثر، وكذلك البلازما غير المتجانسة (الدجاج، فراخ البط، وما إلى ذلك).

يقدم الجدول معلومات عن محتوى عوامل تخثر الدم في مكونات الدم المستخدمة في اختبارات التخثر التصحيحية اعتمادًا على مدة صلاحيتها. باستخدام هذا الجدول، من السهل فك قراءات أي من اختبارات التخثر الثلاثة الرئيسية. تستخدم الطرق التصحيحية من هذا النوع اختبارات موحدة للتلامس وتنشيط الفسفوليبيد، مثل الكاولين كيفالين أو استخدام الهيموليزات (في ACT).

بلازما الدم	عوامل التخثر
	آلية داخلية	آلية خارجية
	الثامن التاسع الحادي عشر والثاني عشر بريكاليكرين	السابع × الخامسثانيا
أصلي (مع مدة صلاحية تصل إلى 18 ساعة)
ممتز *
مع مدة صلاحية تزيد عن 24 ساعة
مدة الصلاحية 2-4 أيام (عند درجة حرارة +4 درجة مئوية)	غير مستعمل
تمت تصفيته**	غير مستعمل
البلازما الأصلية للدجاج أو فراخ البط (حتى عمر 3-4 أيام)		غير مستعمل
ملحوظة. (+) - وجود عامل؛ (-) - غياب.
* تتم عملية الامتزاز إما بواسطة كبريتات الباريوم من البلازما المؤكسدة (BaSO4plasma). أو هلام هيدروكسيد الألومنيوم من بلازما السترات (Al(OH)3 Plasma).
** يتم الترشيح من خلال مرشحين للأسبستوس (مرشحات سيتز) - بمحتوى أسبستوس 20% (الفلتر العلوي) و30% (الفلتر السفلي)، أو من خلال مرشحات مضاعفة أو ثلاثية 30 و20% على التوالي.

اختبارات خلط بلازما دم المريض مع البلازما المعروفة بنقص عامل معين

يتم تحديد وقت الثرومبوبلاستين الجزئي المنشط في اختبار بلازما الدم، والبلازما الطبيعية (التحكم) وفي البلازما مع نقص معروف في العوامل الثامن (من مريض مصاب بالهيموفيليا A)، والتاسع (من مريض مصاب بالهيموفيليا B)، والحادي عشر والثاني عشر . ثم يتم تحضير خليط من عينات البلازما السيتراتية لموضوع الاختبار (حجم 7/10) وبالتتابع مع كل من البلازما الناقصة (حجم 3/10)، بدءاً بنقص العامل الثامن والتاسع ( الأشكال الأكثر شيوعا من علم الأمراض!).

يضاف الكاولين والسيفالين إلى الخليط، وبعد دقيقتين يخضع لإعادة التكلس (عند درجة حرارة 37 درجة مئوية). في الخليط حيث لا يتم تطبيع وقت الثرومبوبلاستين الجزئي المنشط، يوجد نفس عيب التخثر.

وبالتالي، إذا لم يتم تطبيع زمن الثرومبوبلاستين الجزئي المنشط لدى مريض قيد الفحص عن طريق إضافة بلازما الدم من مريض يعاني من نقص العامل الثامن المعروف، ولكن تم تصحيحه بواسطة بلازما الدم من مريض يعاني من نقص العامل التاسع، فإنه لديه الهيموفيليا أ.

وبالمثل، ولكن بناءً على اختبار البروثرومبين، يتم التمييز بين نقص عوامل البروثرومبين المعقدة (X وV وVII وII).

اختبار توليد الثرومبوبلاستين

للتمييز بين اضطرابات الآلية الداخلية لتخثر الدم، الكلاسيكية اختبار توليد الثرومبوبلاستينمع استبدال مكون الصفائح الدموية، الذي يتطلب تحضيره استثمارًا كبيرًا للوقت والدم، بالسيفالين.وتتمثل عيوب اختبار توليد الثرومبوبلاستين في ضخامته، والحاجة إلى تحضير عدد كبير من الكواشف، والوقت الكبير المطلوب لتنفيذه.

اختبار تصحيحي يعتمد على اختبار التخثر الذاتي.

يتم الوفاء بمهام التشخيص السريع بالكامل عن طريق اختبار تصحيح آخر، يعتمد على التصحيح بنفس مكونات الدم الطبيعي على أساس اختبار التخثر الذاتي.

هذا الاختبار موثوق به للغاية وسريع وسهل التنفيذ ويتطلب كمية صغيرة (لا تزيد عن 0.5 مل) من الدم من الشخص المعني، مما يسمح باستخدامه في ممارسة طب الأطفال.

وفيه، كما هو الحال في اختبار توليد الثرومبوبلاستين، يتم استخدام البلازما الممتزة ومصل الدم القديم للتصحيح، والذي يتم طردهما مرة أخرى قبل الدراسة. يتم صب 2 مل من محلول كلوريد الكالسيوم 0.222٪ في ثلاثة أنابيب اختبار ويضاف إلى اثنين منهم 0.1 مل من بلازما الدم الطبيعية الممتزة (الأنبوب الأول) و0.1 مل من مصل الدم الطبيعي القديم (الأنبوب الثاني). أضف 0.2 مل من البلازما الستراتية العادية إلى ثلاثة أنابيب أخرى. ثم يضاف 0.1 مل من الدم الستراتي للموضوع إلى جميع أنابيب الاختبار بمحلول كلوريد الكالسيوم.

وبعد 4 دقائق بالضبط من حضانة هذا الخليط، يتم اختبار نشاط تخثره على البلازما الطبيعية.

يشير الانخفاض الحاد في نشاط التخثر فقط في أنبوب الاختبار الأول (مع بلازما BaSO 4 الطبيعية) إلى أن المريض يعاني من نقص العامل التاسع (الهيموفيليا B)، فقط في أنبوب الاختبار الثاني (مع المصل القديم) - نقص العامل الثامن (الهيموفيليا أ)؛ إذا حدث التصحيح في كلا الأنبوبين (بنفس القدر من القوة)، فمن الواضح أن هناك نقصًا في العامل الحادي عشر أو الثاني عشر (انظر الجدول 14).

اختبارات التخثر التي تميز اضطرابات التخثر وفقًا للآلية الداخلية (مع أوقات البروثرومبين والثرومبين الطبيعية)
عوامل النقص في بلازما الدم المدروسة
	البلازما الممتزة (بدون العامل التاسع)	مصل قديم (بدون عاملثامنا)	خليط من البلازما الممتزة والمصل القديم
العامل الثامن
العوامل الحادي عشر أو الثاني عشر

هذا الاختبار حساس للغاية، حيث يتم إجراء الدراسة على الدم المخفف 20 مرة مع تعويض عامل الصفائح الدموية 3 بالهيموليزات. الكاشف الوحيد المستخدم هو محلول كلوريد الكالسيوم منخفض التوتر، مما يجعل العينة متاحة للجمهور.

بنفس القدر من البساطة هي تقنية اختبارات التصحيح التي يتم إجراؤها على أساس اختبار البروثرومبين للتمييز بين نقص العوامل II و V و VII + و X (في الجدول).

اختبارات التخثر تميز نقص العامل الثاني والخامس والخامسالثاني+،+X، يتم إجراؤه على أساس اختبار البروثرومبين (مع زمن الثرومبين الطبيعي)
عوامل النقص في بلازما الدم المدروسة	مكونات الدم الطبيعي تضاف إلى اختبار البلازما
	البلازما الممتزة (بدون العوامل II، VII، X)	البلازما القديمة (بدون العامل الخامس)	البلازما المفلترة (بدون عواملالسابع و العاشر)	مصل قديم (بدون عواملالثاني والخامس)
العوامل السابع أو العاشر
ملحوظة. (+) - تطبيع التخثر. (-) - عدم تطبيع التخثر.

من أجل التمييز بين نقص العامل السابع والعاشر يتم إجراء اختبار تخثر إضافي مع إضافة محلول سم الأفعى إلى اختبار بلازما الدم - الدواء com.lebetox(يتم اختيار تركيز السم الذي يؤدي في وجود السيفالين وكلوريد الكالسيوم إلى تخثر الدم خلال 20-25 ثانية؛ تؤخذ جميع المكونات بكمية 0.1 مل وتخلط) (الجدول أدناه).

ولنفس الغرض يستخدم مستحضر من سم أفعى راسل التي تعيش في الهند (مستحضر com.stepwen).

اختبارات التخثر للتمييز بين نقص العامل السابع والعامل العاشر باستخدام سم الأفعى (ليبيتوكس)
عوامل النقص في بلازما الدم المدروسة	الاختبارات
	بسم الأفعى + سيفالين + كلوريد الكالسيوم	بسم الأفعى + سيفالين + كلوريد الكالسيوم + بلازما الدم المفلترة (مصدر العوامل V أالثامن)	البروثرومبين
العامل السابع
ملحوظة. (+) - تطبيع التخثر. (-) - عدم تطبيع التخثر.

يتم استكمال التشخيص التفريقي، إذا لزم الأمر، عن طريق التحديد الكمي للعوامل الناقصة أو مثبطاتها المناعية المحددة، والتي يتم من خلالها استخدام تقنيات موحدة خاصة شديدة الحساسية. تستخدم هذه الطرق بناء منحنيات التخفيف لعينات مختلطة من بلازما الدم الطبيعية مع تصحيح النقص في جميع العوامل باستثناء العامل الذي تتم دراسته. وتستخدم هذه المنحنيات لتحديد نشاط عامل الاختبار في بلازما المرضى.

من المهم بشكل خاص قياس تركيز العوامل VIII و IX، بالإضافة إلى وجود مثبطاتها في المرضى الذين يعانون من الهيموفيليا A و B (خاصة قبل وأثناء الجراحة وأثناء العلاج البديل المكثف)، وكذلك في نزيف ما بعد الولادة الغزير المتأخر. ، عندما يكون من الضروري التمييز بين متلازمة مدينة دبي للإنترنت والأمراض الأكثر ندرة - ظهور مثبط مناعي للعامل الثامن (وأكثر ندرة - العامل الخامس).

مع نقص حاد في العامل الثالث عشر(مرض وراثي نادر جدًا) جميع اختبارات التخثر طبيعية، لكن الجلطات تذوب في 5M أو 7M من اليوريا.

كما أنه يساعد على التمييز بين نقص عوامل التخثر المختلفة من خلال مراعاة درجة، وخاصة توقيت تطبيع قراءات الاختبار بعد إعطاء منتجات الدم عن طريق الوريد للمرضى، أي. المحاسبة للتصحيحفي الجسم الحيحسب طريقة L. Z. Barkagan.

تكون هذه التقنية فعالة بشكل خاص عندما يكون هناك اختلاف كبير في العمر المتوقع للعوامل المختلفة في الدورة الدموية. وهكذا فإن نصف عمر عوامل البروثرومبين المعقدة يختلف من عدة ساعات (العامل السابع) إلى عدة أيام (العامل الثاني). يشغل الموضع الوسيط بينهما العامل X (2-2.5 يوم) والعامل V (12-18 ساعة).

لذلك، بعد نقل نفاث كبير للبلازما، يرتفع مؤشر البروثرومبين مع نقص العامل السابع لفترة وجيزة جدًا، مع نقص العامل الخامس - لفترة أطول قليلاً (حوالي 4-6 مرات)، ومع نقص العوامل X وخاصة II، لفترة أطول (أكثر من 1-2 أيام). يدل في هذا الصدد على تأثير عقار PPSB (تركيز العوامل السابع والتاسع والعاشر والثاني) على مؤشر البروثرومبين. كما أنه يعيد زمن البروثرومبين إلى طبيعته لفترة قصيرة في حالة نقص العامل السابع ولفترة أطول (عدة مرات!) في حالة نقص العاملين X و II. وبما أن هذا الدواء لا يحتوي على العامل الخامس، فلا يتم تصحيح هذا النقص به.

تم الكشف عن اختلاف مماثل أثناء نقل الدم والعلاج البديل لعوامل آلية التخثر الداخلي (الثاني عشر والحادي عشر والتاسع والثامن)، والذي يتم تسجيله بواسطة اختبار الثرومبوبلاستين الجزئي المنشط.

ومما يثير الاهتمام بشكل خاص ديناميكيات تصحيح مستويات العامل الثامن ومؤشرات aPTT أثناء علاج نقل الدم لمرض الهيموفيليا A ومرض فون ويلبراند. في أول هذه الأمراض، يتم اكتشاف الحد الأقصى الفوري من التحسن في تخثر الدم بعد نقل البلازما المضادة للهيموفيليا (في مجرى سريع!) أو إعطاء الراسب البردي، ثم انخفاض سريع إلى حد ما (خلال 10-18 ساعة) فيه. بينما في مرض فون ويلبراند هناك زيادة طفيفة في نشاط التخثر لعدة ساعات بعد نقل الدم، ومن ثم يكون انخفاضه أبطأ بكثير من مع. في هذا الصدد، في علاج مرض فون ويلبراند، يتم استخدام عمليات نقل الدم البديلة بشكل أقل من علاج الهيموفيليا أ.

دراسة النشاط الوظيفي لعوامل التخثر ومكونات نظام الكاليكرين كينين وتحلل الفيبرين باستخدام ركائز مولدة للضوء

تعتمد الطرق على دراسة نشاط الإنزيمات المحللة للبروتين ومثبطاتها المشاركة في تخثر الدم وانحلال الفيبرين وتكوين الكينين، بناءً على شدة ومعدل انقسام الببتيدات الحساسة تحديدًا لهذه الإنزيمات، والتي يؤدي تحللها إلى إطلاق عامل تلوين (بيتا-نيتروانيلين).

درجة لون الخليط المتفاعليتم تحديده طيفيًا، ومن خلال شدته يتم الحكم على نشاط الإنزيمات المقابلة (عوامل التخثر، الكاليكرين، البلازمين، وما إلى ذلك)، ومن خلال تثبيط العملية، يتم الحكم على نشاط مثبطات الإنزيم.

على سبيل المثال، يمكن تقييم تأثير الهيبارين ومضاد الثرومبين III عن طريق إضعاف انقسام الركائز مولدة اللون بواسطة العامل Xa أو الثرومبين، ويمكن تقييم نشاط α 2 - مضاد البلازمين عن طريق إضعاف تأثير البلازمين على الركيزة مولدة اللون المقابلة. ركائز كروموجينيةإما أن يكون لها تعيين رقمي (على سبيل المثال، s-2222)، أو تسمى الكروموسينات ببادئة مختصرة تشير إلى الإنزيم الذي تكون هذه الركيزة حساسة له (على سبيل المثال، Chromozym PL - ركيزة البلازمين، Chromozym TH - ركيزة الثرومبين، Chromozym PK - البريكاليكرين/الركيزة كاليكريين وما إلى ذلك).

تعمل الركائز اللونية على توسيع إمكانيات دراسة نظام الإرقاء، ولكنها ليست متاحة بعد بما يكفي للعديد من المختبرات. بعض الدراسات التي يتم إجراؤها بمساعدتهم لا تتمتع بمزايا مقارنة باختبارات التخثر التقليدية وتعطي نتائج متطابقة معها؛ وفي حالات أخرى، يؤدي استخدامها إلى تبسيط البحث وتسريعه، مما يجعله أكثر دقة؛ ثالثًا، هذه الطرق لها أهمية مستقلة ولا يمكن استبدالها باختبارات التخثر (على سبيل المثال، تحديد البريكاليكرين).

التحديد المناعي لمكونات نظام مرقئ

يتم إجراء التحديد المناعي لمكونات الجهاز المرقئ باستخدام الطرق التالية:

• الهطول المناعي.
• الرحلان الكهربائي المناعي.
• المناعي الإشعاعي وغيرها مع الأمصال المضادة المناسبة

في هذه الحالة، يتم تقييم محتوى المستضد لعامل تخثر معين (أو شظاياه) في بلازما الدم، وليس النشاط الوظيفي، والذي يمكن تقليله بشكل حاد إذا كان محتوى المستضد في البلازما طبيعيًا. يعتبر هذا الوضع نموذجيًا لجميع الحالات التي يقوم فيها الجسم بتوليف عوامل غير طبيعية (معيبة وظيفيًا) تحتفظ بمستضداتها، ولكنها تفتقر إلى القدرة على المشاركة في الإرقاء.

وهذا يجعل من الممكن التمييز بين التوقف الكامل لتوليف العوامل المقابلة وتشكيل أشكالها الشاذة.

ومع ذلك، لا يمكن تحديد عدد من مكونات نظام مرقئ إلا مناعيا.

تتضمن هذه المجموعة دراسات مهمة مثل تحديد المكونات التالية:

• بيتا الثرومبوبولين.
• α2-ماكروغلوبولين.
• البروتينات C و S؛
• العامل الثامن:C والثامن:مستضدات cof R؛
• منتجات انحلال الفيبرين (PDF)؛
• المستضدات الجديدة للثرومبين - مضاد الثرومبين الثالث والبلازمين - مجمعات مضادات البلازمين.
• عدد من الاختبارات الأخرى.

ولذلك، فإن البحوث المناعية تكمل بشكل كبير التقييم الوظيفي لأجزاء مختلفة من نظام مرقئ.

الاختبارات التشخيصية تعتمد على استخدام مستحضرات سم الثعبان ككواشف

لقد ثبت منذ فترة طويلة أن سموم العديد من الثعابين تحتوي على إنزيمات بروتينية نشطة للغاية تسبب تخثر الدم وتؤثر على أجزاء مختلفة من سلسلة التخثر. ونتيجة لذلك، يتم استخدام سموم الثعابين والتخثرات المعزولة منها على نطاق واسع للتعرف على اضطرابات الإرقاء، وتحديد عوامل التخثر، وتحديد وقياس مجمعات مونومر الفيبرين القابلة للذوبان (SFMCs)، وعدد من الدراسات الأخرى.

غالبًا ما تجعل اختبارات سموم الثعابين تشخيص اضطرابات الإرقاء أسهل بكثير وأكثر كفاءة.

يقدم الجدول بيانات عن آلية عمل السموم على نظام تخثر الدم وإمكانيات الاستخدام التشخيصي لكل منها.

خصائص تخثر الدم لسموم الثعابين واستخدامها في الممارسة التشخيصية
أسماء الثعابين * والمستحضرات من سمومها	آلية العمل على نظام التخثر	الاختلافات عن خصائص عوامل التخثر الطبيعية	إمكانيات التطبيقات التشخيصية
فيبيرا ليبيتينا)؛ ليبيتوكس (أفعى راسل؛ ستيبوين)	منشط العامل X (في وجود الكالسيوم والعامل الخامس والفوسفوليبيد**)	وعلى عكس ثرومبوبلاستين الأنسجة، فهو لا يحتوي على الفسفوليبيد ولا يعوض نقصه. لا يحتاج إلى العامل السابع للتخثر	تحديد العامل والصفائح الدموية وإطلاقها أثناء التجميع؛ التمييز بين نقص العامل السابع ونقص العامل العاشر؛ تقدير العامل X
إيفا متعدد النطاقات (Echis multisgumatos) وإيفا رملية (Echis carinatus)؛ إكارين، إيكيتوكس	منشط العامل الثاني، يشكل ثرومبين-إم غير نمطي	على عكس ألفا-ثرومبين، لا يتم حظر الثرومبين-إم بواسطة الهيبارين ومضاد الثرومبين الثالث، ولا ينشط العامل الثالث عشر (تتحلل الجلطات في اليوريا)، ويخثر مجمع الفيبرينوجين بالكامل وجميع مجمعات مونومر الفيبرين القابلة للذوبان.	الكشف عن فرط تخثر الدم، بما في ذلك المخفية، أثناء العلاج بالهيبارين. التحديد الكمي للفيبرينوجين الكلي وRFMC لتشخيص ثرومبين الدم ومتلازمة مدينة دبي للإنترنت
الفم القطني الشائع (Aghistrodon halus halus)، بالإضافة إلى العديد من الأفاعي الجرسية في أمريكا الاستوائية وآسيا؛ أنسيسترون-H1، ريبتيلاز، بوتروبكلوتاز، كروتالاز، أنكرود، إلخ.	يخثر الفيبرينوجين، ويشق الببتيدات A فقط ويشكل مونومرات الفيبرين غير المكتملة (des-A-fibrin)	لا يقسم الببتيدات B، ولا ينشط العامل الثالث عشر والصفائح الدموية، ولا يسبب تراجع الجلطة، ولا يحجبه الهيبارين، ويذيب الجلطات بسرعة	التعرف على خلل الفبرينوجين في الدم. تقييم دور الهيبارين في تعطيل المرحلة النهائية من التخثر (مقارنة بزمن الثرومبين)
* تعيش كل هذه الثعابين في آسيا الوسطى (يشار بين قوسين إلى الأنواع الأخرى التي لها آلية عمل مماثلة ومستحضراتها ذات العلامات التجارية ؛ تعيش أفعى راسل في الهند ، وتعيش أفعى دابوي في أستراليا.
** نظير السيفالين وعامل الصفائح الدموية 3.

يتم توسيع هذه الاحتمالات بشكل أكبر من خلال الاستخدام المتزامن للعديد من السموم وأبسط اختبارات التخثر العامة. على سبيل المثال، فإن الاستخدام المتزامن لاختبارات التخثر مع سم الأفعى والإيفا يجعل من الممكن التمييز بسهولة بين نقص العوامل VII وX-V وII (في الجدول أدناه)، ومع التصحيح الإضافي باستخدام البلازما الطبيعية المفلترة (مصدر العوامل V و II) - نقص العوامل X و V.

اختبارات التخثر باستخدام السموم المختلفة، والتمييز بين نقص عوامل البروثرومبين المعقدة
عوامل النقص في بلازما الدم المدروسة	الاختبارات
	بسم الأفعى + سيفالين	مع سم إيفا	البروثرومبين
ملحوظة. (+) - تطبيع التخثر. (-) - عدم تطبيع التخثر.

تحديد مضادات التخثر الفسيولوجية الرئيسية

الشيء الأكثر أهمية هو تحديد نشاط مضاد التخثر الفسيولوجي الرئيسي - مضاد الثرومبين III، والذي يمكن تحديد انخفاضه وراثيًا (أهبة التخثر الأولي) أو الثانوي بسبب الاستهلاك المكثف (متلازمة مدينة دبي للإنترنت، تجلط الدم الهائل) أو التمثيل الغذائي المتسارع (العلاج بالهيبارين). ، L-asparaginase، وسائل منع الحمل الاصطناعية) والحصار من قبل المجمعات المناعية، البروتينات، فيبرونكتين، بروتينات المرحلة الحادة.

على أية حال، فإن انخفاض نشاط مضاد الثرومبين III أقل من 60-65٪ يحافظ على تخثر الدم داخل الأوعية الدموية ويجعل تأثير الهيبارين المضاد للتخثر أقل وضوحًا. ومع ذلك، في كثير من الأحيان لا يوجد توافق طبيعي بين مستوى مضاد الثرومبين الثالث وانخفاض الحساسية للهيبارين.

في هذه الحالة، عادة ما يسود إضعاف تأثير مضاد التخثر للهيبارين بشكل كبير على درجة انخفاض نشاط مضاد الثرومبين الثالث. لقد ثبت أنه في أشكال مختلفة من نقص مضاد الثرومبين III، يمكن أن يتغير تقاربه مع الهيبارين بدرجات متفاوتة. بالإضافة إلى ذلك، فإن الأجزاء المختلفة من الهيبارين، والتي تكون نسبتها في الأدوية متغيرة جدًا، لها أيضًا ارتباطات مختلفة بمضاد الثرومبين III. لذلك، من المهم عمليًا دراسة النشاط الفعلي لمضاد الثرومبين III وقدرته على التحول تحت تأثير الهيبارين إلى مضاد تخثر سريع المفعول.

النشاط المضاد للتخثر لمضاد الثرومبين III

النشاط المضاد للتخثر لمضاد الثرومبين IIIتتحدد من خلال قدرة بلازما الدم قيد الدراسة ( مُطلّق- طريقة كوبلي-وينترشتاين أو تمسخ الحرارة منزوع الرجفانعند درجة حرارة 56 درجة مئوية - طرق Loliger وAbildgaard وما إلى ذلك) لتعطيل الثرومبين المعطى خارجيًا لفترة معينة من الزمن. يمكن تحديد نشاط الثرومبين المتبقي في مثل هذه البلازما من خلال نشاط التخثر (على الفيبرينوجين، البلازما الممتزة بكبريتات الباريوم) أو عن طريق انقسام الركيزة مولدة اللون الحساسة للثرومبين أو العامل Xa (نظرًا لأن مضاد الثرومبين III يعطل هذا العامل أيضًا).

نشاط العامل المساعد للهيبارين

نشاط العامل المساعد للهيبارين لمضاد الثرومبين الثالث الموجود في بلازما الدمتم تحديد فترة طويلة باستخدام اختبار تحمل الهيبارين في البلازما، والذي يمكن اعتباره مؤشرًا، لأنه يعطي نطاقًا واسعًا جدًا من القيم الطبيعية وغير قابل للتكرار بدرجة كافية.

الاختبارات التي تفحص تأثير تراكيز مختلفة من الهيبارين على زمن الثرومبين في بلازما الاختبار التي تحتوي على عدد صغير من الصفائح الدموية تكون أكثر دقة وقابلة للتكرار. تتم المقارنة مع إطالة زمن الثرومبين للتحكم في بلازما الدم الطبيعية، والتي تضاف إليها نفس عينات الهيبارين.

وهكذا، في اختبار الثرومبين-الهيبارين، تتم إضافة هذه الكميات من الهيبارين إلى بلازما دم الاختبار، مما يؤدي، في التحكم، إلى إطالة زمن الثرومبين من 15 إلى 32-35 ثانية (تركيز منخفض) وإلى 95-110 ثانية (تركيز عالي). الهيبارين). بناءً على هذه البيانات، يتم حساب مؤشرات نشاط مضاد الثرومبين في البلازما (APA) واحتياطي مضادات التخثر في البلازما (APR).

تُستخدم أيضًا تقنيات مماثلة على نطاق واسع لتقييم درجة تعطيل الثرومبين في اختبارات التخثر وعلى الركائز اللونية.

التحديد المناعي لمستضد مضاد الثرومبين الثالث

التحديد المناعي لمستضد مضاد الثرومبين الثالثيسمح لك بالتمييز بين أنواع مختلفة من التخثر:

• مع عدم كفاية تخليق مضاد الثرومبين الثالث (انخفاض مستوى علامة المستضد بشكل مناسب إلى انخفاض النشاط) ؛
• مع التوليف المحفوظ لأشكال غير طبيعية ومعيبة وظيفيًا (مستوى علامة المستضد أعلى بكثير من النشاط).

يتم تحديد البروتينات C وS والثرومبومودولين وα2-macroglobulin بواسطة الطرق الإنزيمية المناعية.

وقت التخثر هو الوقت الذي يمر من لحظة أخذ عينة الدم من الوريد حتى يتم تخثرها بالكامل في أنبوب الاختبار. يمكن أن تتم عملية تخثر الدم عن طريق تفعيل النجاسة(على أساس ثرومبوبلاستين الأنسجة) أو عن طريق التنشيط الداخلي (عند ملامسة سطح مشحون بشحنة سالبة، على سبيل المثال، الكولاجين في جدار الوعاء الدموي التالف).

يؤدي تنشيط هذه الأنظمة إلى سلسلة من التفاعلات التي تلعب فيها عوامل تخثر البلازما دورًا رئيسيًا. وهي التي تؤدي في النهاية إلى تحول الفيبرينوجين إلى الفيبرين، مما يشكل جلطة دموية ويوقف النزيف.

وقت التخثريتم استخدامه لتقييم المسار الصحيح لجميع هذه العمليات. وقد يكون سبب إطالة أمدها، على سبيل المثال، نقص أي من عوامل البلازما المشاركة في عملية تخثر الدم.

ومع ذلك، يجب أن نتذكر أنه نظرًا لعدم توحيد الطريقة وانخفاض إمكانية تكرار نتائج طريقة تحديد النتائج، فضلاً عن توفر طرق أكثر تقدمًا، نادرًا ما يتم استخدام أوقات التخثر الآن.

تعريف وزمن تخثر الدم المقبول

يتم فحص زمن التخثر على عينة دم وريدية مأخوذة من الوريد المضاد للأكواب. يجب أن تصل لأخذ عينة من الدم لإجراء الاختبار على معدة فارغة، ويجب أن تتناول وجبتك الأخيرة في موعد لا يتجاوز 8 ساعات قبل الاختبار.

يتم تقييم وقت تخثر الدم في أغلب الأحيان طريقة لي وايت. تتيح لك هذه الطريقة تقييم فعالية الجميع أنظمة التخثرمع التركيز على نشاط عامل هاجمان (وهذا هو عامل تخثر الدم الثاني عشر).

إذا تم إجراء القياس في أنابيب اختبار زجاجية، اعتمادًا على درجة الحرارة، فإن القيم الصحيحة هي 4-10 دقائق (عند درجة حرارة 37 درجة)، و6-12 دقيقة (عند درجة حرارة 20 درجة).

ومع ذلك، يجب أن نتذكر أنه بسبب الصعوبات في توحيد الطريقة، من الصعب تحديد القيمة الصحيحة بشكل لا لبس فيه وقت تخثر الدموبالتالي قد تختلف النتائج بين المختبرات.

بالإضافة إلى ذلك، يجب الأخذ في الاعتبار أن وقت تخثر الدم يتأثر بعوامل مثل:

• حجم الأنبوب
• نوع المادة التي صنع منها أنبوب الاختبار (الزجاج، السيليكون)؛
• نوع الزجاج الذي يتكون منه أنبوب الاختبار.

ونظراً لكل هذه التبعيات والتباين الكبير في نتائج قياس زمن تخثر الدم، فقد تم استبداله باختبار زمن البروثرومبين وزمن الثرومبوبلاستين الجزئي المنشط.

تفسير نتائج وقت تخثر الدم

إطالة مدة تخثر الدميحدث في الحالات التالية:

• علاج الهيبارين- وهي مادة تمنع عملية التخثر، واستخدامها يتطلب مراقبة نظام مرقئ. ومع ذلك، ونظرًا للصعوبة المذكورة أعلاه في تحديد وقت التخثر، فإنه يستخدم بشكل عام لمراقبة العلاج بالهيبارين غير المجزأ؛ ولهذا الغرض، يتم استخدام اختبار APTT. ومع ذلك، حتى لو استخدمنا تعريف وقت التخثر في حالة الاستخدام الهيبارينوينبغي توسيعها من 1.5 إلى 3 أضعاف القيم العادية؛؛ ومع ذلك، إذا استخدمنا تحديد وقت التخثر، على الرغم من ذلك، في حالة التقديم الهيبارين غير المجزأيجب زيادة القيم المسموح بها بمقدار 1.5 - 3 مرات؛
• نقص عامل التخثر- الثاني، الخامس، الثامن، التاسع، العاشر، الحادي عشر، الثاني عشر - يؤدي نقص هذه العوامل إلى أهبة البلازما- قد يكون سبب حدوثه انتهاكا لتوليف هذه العوامل أثناء أمراض الكبد المختلفة.
• الهيموفيليا- عيب خلقي في نظام تخثر الدم الناجم عن نقص العوامل الثامن أو التاسع أو الحادي عشر؛ يتطلب المرض تجديدًا مستمرًا للعامل المفقود، خاصة قبل الإجراءات أو العمليات الجراحية المخطط لها، وإلا فقد يؤدي إلى نزيف يهدد الحياة؛
• مضادات التخثر المتداولة- الأجسام المضادة للفوسفوليبيد التي تظهر في متلازمة أضداد الفوسفوليبيد والذئبة الحمامية الجهازية.

تذكر ذلك الوقت الصحيح لتخثر الدملا يشير إلى غياب اضطرابات التوازن. يمكن تزوير نتيجة اختبار تخثر الدم إذا تم إجراؤه أثناء الحيض والحمل.

مخطط تجلط الدم.

الاختبارات الأكثر استخدامًا لدراسة الإرقاء هي:

1. وقت تخثر الدم الوريدي لـ Lee-White هو الوقت الذي يستغرقه تكوين الجلطة في ملليلتر واحد من الدم الوريدي الأصلي للمريض في أنبوب اختبار زجاجي عند 37 درجة مئوية، عادة من 5 إلى 8 دقائق. هذا اختبار تخثر عام إرشادي، أي. يصف نظام تخثر الدم ككل بقيم طبيعية، ويوفر هذا الاختبار معلومات تفيد بأن PTI أكثر من 30٪، والفبرينوجين أكثر من 1 جم / لتر.
2. وقت إعادة حساب البلازما هو الوقت الذي تستغرقه بلازما المريض (التي تم الحصول عليها من الدم المستقر بمحلول سترات الصوديوم) للتجلط عند إضافة محلول كلوريد الكالسيوم إليها. عادة 120-150 ثانية. هذا اختبار تخثر عام إرشادي.
3. وقت إعادة التكلس المنشط هو وقت تخثر بلازما المريض (يتم الحصول عليه من الدم "السيترات") عند إضافة عينة من الكاولين (الكاولين عبارة عن طين أبيض، وهو عبارة عن مادة خافضة للتوتر السطحي تستخدم لتعطيل التخثر بالتلامس من أجل تحديد الاضطرابات في الدم بشكل أكثر دقة مراحل تخثر الدم) بعد إعادة التكلس بإضافة كلوريد الكالسيوم. عادة 60-80 ثانية. إنها طريقة دقيقة وحساسة.
4. تحديد محتوى الفيبرينوجين وفقًا لـ R. L. Rutberg. تعتمد الطريقة على إعادة حساب مليلتر واحد من البلازما الستراتية ووزن جلطة الفيبرين الناتجة (بعد عصر الطور السائل منها). الوزن الطبيعي لمثل هذه الجلطة هو 9-18 ملجم، والذي يتوافق وفقًا لمنحنيات المعايرة مع تركيز الفيبرينوجين بمقدار 2-4 جم / لتر.
5. اختبارات التخثر (B - النفثول، الإيثانول، كبريتات البروتامين) - تكتشف وجود RKMF في دم المريض (مركب قابل للذوبان من مونومرات الفيبرين - وهو مركب من المونومرات والبوليمرات الجزئية (غير كاملة)، قابل للذوبان في الماء، الاسم القديم فلوبرينوجين ب). يشير وجود RKMF في الدم إلى احتمال أو وجود الترومبون أو DIC. تتم إضافة الكاشف المناسب (B – نادولول، كبريتات البروتامين أو 50٪ إيثانول) إلى البلازما السيترية للمريض. في وجود RCMP، يتم إطلاق مونومرات الفيبرين، ويعمل عمل مكونات التخثر في البلازما على بلمرة هذه المونومرات لتكوين جلطة. في الحالة الطبيعية، لا يوجد RKMP في الدم، لذلك لا تتشكل جلطة أثناء الاختبار.
6. الفيبرينوجين ب هو RKMF. عادة غائبة. إذا كان موجودًا، معبرًا عنه كعلامة زائد، فهناك فرط تخثر الدم، مع تجلط الدم المحتمل أو الواضح.
7. زمن البروثرومبين (مرادف - مؤشر البروثرومبين) هو زمن تخثر البلازما السيترية بعد إضافة محلول قياسي من الثرومبوبلاستين وكلوريد الكالسيوم. يميز نشاط العوامل السابعة والعاشرة والخامسة والثانية لمركب البروثرومبين، والتي تعتمد على فيتامين ك. ولذلك، يُستخدم الاختبار على نطاق واسع لمراقبة العلاج بمضادات التخثر غير المباشرة (مضادات الفيتامينات K). عند استخدام الثرومبوبلاستين القياسي عالي النشاط، يتم التعبير عن النتيجة بالثواني (عادة 12-15 ثانية)، ولكن نظرًا لعدم امتثال معظم الثرومبوبلاستين المحلي للمعيار، يتم التعبير عن النتيجة نسبيًا بالنسبة المئوية أو وحدات زمن البروثرومبين في البلازما. القاعدة هي 80-100% أو 0.8-1.1. لا يمكن أن تكون النتيجة أعلى من 110% وإلا فهو خطأ مختبري.
8. تنشيط زمن الثرومبوبلاستين جزئيًا (جزئيًا) - APTT وAPTT - مرادفًا لزمن بلازما الكاولين-كيفالين. الكيفالين عبارة عن معلق للدهون الفوسفاتية اللازمة لتخثر الدم. مثل الكاولين، يتم استخدام السيفالين لتقليل تخثر العجين، وبالتالي توحيد وزيادة دقة العجين. في هذه الحالة، يتم إدخال عينة من الكاولين (وقت الكاولين 60-70 ثانية) والسيفالين (وقت الكيفالين (إذا تم إعطاء السيفالين فقط) مرادفًا لوقت الثرومبوبلاستين الجزئي، المعيار هو 55-56 ثانية) في بلازما السترات قبل إعادة الحساب. aPTT الطبيعي (أي مع إضافة الكاولين والسيفالين) هو 35-45 ثانية. كيفالين هو بديل لعامل الصفائح الدموية 3. الاختبار حساس للغاية لعيوب البلازما (النقص الثاني عشر، الحادي عشر، التاسع، الثامن، وكذلك مضادات التخثر الزائدة). مع نقص تخثر الدم الخفيف، يكون APTT 50-60 ثانية، معتدل - 80-90 ثانية، وضوحا أكثر من 90 ثانية. في حالة فرط تخثر الدم، تكون مدة APTT أقل من 30 ثانية.
9. تحديد عدد الصفائح الدموية في الدم. عادي (180-320)*10^9/لتر. يحسبون في غرفة أو في مسحة.
10. تحديد وقت النزيف (بطريقة ديوك، بورشغريفين، آيفي، الخ). هذا هو وقت النزيف من جرح على سكين (ثقب أو خدش صغير) عند الضغط الوريدي الطبيعي أو عند وضع الكفة على الكتف، حيث يتم إنشاء ضغط قدره 40 ملم زئبق. القاعدة تصل إلى 5 دقائق (عند تطبيق الكفة تصل إلى 8 دقائق). يميز الحالة العامة لإرقاء الصفائح الدموية.
11. زمن تخثر البلازما الصفائح الدموية. هذا هو وقت تخثر البلازما الطبيعية عند إضافة محلول الثرومبين بكميات متساوية. يعطي فكرة عن حالة ___________ مرحلة التخثر. عادة 14-16 ثانية. مع فرط تخثر الدم يقصر، مع نقص تخثر الدم يطول.
12. اختبار التخثر الذاتي. امزج 0.1 مل من دم المريض المحمض مع 2 مل من محلول CaCl2 منخفض التوتر بنسبة 0.222% لتكوين هيموليزيت - خليط الكالسيوم الذي تبدأ فيه عملية تنشيط البروثرومبين وتحويله إلى ثرومبين. تتم إضافة هذا الهيموليزات إلى بلازما المريض في أوقات مختلفة (الدقيقة الثانية، الرابعة، السادسة، الثامنة، العاشرة، العشرين، الثلاثين، الأربعين، الخمسين، الستين أو في كثير من الأحيان فقط في الدقائق الثامنة والعاشرة). تم إنشاء رسم بياني يوضح الزيادة في نشاط الثرومبوبلاستين والثرومبين، وكذلك معدل تعطيل الثرومبين بواسطة مضادات الثرومبين ومنتجات انحلال الفيبرين.

يميز نقص تخثر الدم الطبيعي في الدقيقتين الثامنة والعاشرة. 7-11 ثانية.

13 مضاد الثرومبين III هو مضاد التخثر الأساسي لبلازما الدم. تتم إزالة رجفان البلازما قيد الدراسة (عن طريق التسخين أو سم الثعبان أو طرق أخرى)، ثم تتم إضافة كمية قياسية من الثرومبين (يمكنك إضافة العامل المنشط Xa، والذي يتم حظره أيضًا بواسطة مضاد الثرومبين III، وهذا هو البديل من الطريقة). يتم تحضين الخليط عند 37 درجة مئوية ثم يتم اختباره على محلول الفيبرينوجين أو البلازما الممتزة كل 3 دقائق. في غضون 9 دقائق. حول مستوى مضاد الثرومبين الثالث عن طريق إضعاف نشاط تخثر الثرومبين (التحديد الكمي باستخدام منحنى المعايرة). الطبيعي هو 90-100٪. يعمل الهيبارين فقط في وجود مضاد الثرومبين الثالث (عند دمجه معه).

14 تحمل البلازما للهيبارين هو زمن تخثر البلازما السيترية عند إضافة كميات صغيرة من الهيبارين إليها وإعادة التكلس لاحقًا. عادة 5-7 دقائق. هذا اختبار تخثر عام، ولكنه يعكس بشكل أكثر حساسية الميل إلى تكوين الخثرة، ويستغرق الاختبار أقل من 5 دقائق، وهو ما يرتبط على ما يبدو بانخفاض في مضاد الثرومبين الثالث.

15 انقباض جلطة الدم هو جزء من السائل الذي تضغطه الجلطة أثناء الانقباض من الكميةبلازما. عادة 65 – 85%. أقل من 65% عبارة عن جلطة مترهلة، وأكثر من 65% منها كثيفة. الاختبار غير دقيق للغاية وغير مفيد ويعتمد على جودة الزجاج والمختبرات الأخرى. الملحقات، فضلا عن المعلمات الدم البيوكيميائية.

16 انحلال الفيبرين العفوي هو عدد خلايا الدم الحمراء التي تسقط من الجلطة أثناء عملية التراجع والتحلل، أي. "مقياس للتدمير التلقائي للجلطة" أثناء الحضانة عند 37 درجة مئوية لمدة ساعتين (3 ساعات ممكنة). الطريقة غير دقيقة وغير صحيحة لأن... لقد ثبت أن تكوين الرواسب _____________ كريات الدم الحمراء لا يرتبط بانحلال الفيبرين. عادة 10-20%

17 طريقة الأيوجلوبيولين لتحديد نشاط تحلل الفيبرين (اختبار الصين-الأويجلوبيولين). هذا هو وقت ذوبان جلطة اليوغلوبولين المترسبة من بلازما الاختبار مع حمض الأسيتيك والمتخثرة بكلوريد الكالسيوم (أو الثرومبين). وفقًا لطريقة Kovarzyk-Buluk: يتم ترسيب جزء الأوجلوبيولين (هذا هو البلازمينوجين ومنشطاته وعوامل التخثر والفيبرينوجين) في بيئة حمضية عند درجة حرارة منخفضة. تترسب مثبطات انحلال الفيبرين بكميات صغيرة جدًا. يتم إذابة جزء اليوغلوبولين، ثم يحدث التخثر فيه (بإضافة كلوريد الكالسيوم أو الثرومبين)، ويتم تحديد وقت تحلل الجلطة الناتجة عند 37 درجة مئوية. عادة 3-4 ساعات (2-4، في المتوسط ​​3 ساعات). مع زيادة نشاط تحلل الفيبرين، يتسارع التحلل، ومع نقص البلازمينوجين ومنشطاته يتباطأ. يتم استخدام تقنية لتحديد نشاط نظام تحلل الفيبرين.

18 الاختبارات السريرية للقرص والعاصبة واختبار كأس نيستيروف. إنها تظهر حالة نفاذية جدار الأوعية الدموية تحت تأثير تأثير مداوي نسبيًا (قرص الجلد، وضع عاصبة على الكتف، عمل الشفط لـ "العلبة" عندما يتخلخل الهواء الموجود فيها). أنها توفر معلومات تقريبية ولكنها مهمة في كثير من الأحيان حول حالة إرقاء الصفائح الدموية. يتم تقييم النتيجة من خلال عدد النمشات التي تظهر على منطقة الجلد التي تم فحصها بعد التأثير الميكانيكي.

تشمل اختبارات تخثر الدم الرئيسية تحديد وقت تخثر الدم (وفقًا لـ Lee-White)، ووقت إعادة حساب البلازما، ومعدل APTT، ووقت تراجع جلطة الدم وبعض المعالم الأخرى.

وقت التخثر

يتم تعريف وقت تخثر الدم من نوع Lee-White على أنه الوقت المنقضي من لحظة أخذ الدم من الوعاء إلى تكوين جلطة دموية.

هذا المؤشر غير محدد ويميز نظام تخثر الدم ككل.

لإجراء التحليل، يتم سحب ملليلتر واحد من الدم في أنبوب اختبار (عادي أو سيليكون) ويُحفظ عند درجة حرارة 37 درجة. عادة، في أنبوب غير سيليكون، يتم تجلط الدم في 5-7 دقائق، وفي أنبوب السيليكون - في 15-25.

يمكن تمديد وقت تخثر الدم في الحالات التالية:

• فقر الدم بسبب فقدان الدم.
• أمراض الصفائح الدموية.
• نقص عوامل التخثر في الدم.
• زيادة مواد تسييل الدم (مضادات التخثر).

إذا لم يتجلط الدم على الإطلاق، فغالبًا ما يكون ذلك علامة على نقص حاد في الفيبرينوجين.

من النادر جدًا حدوث انخفاض في وقت تخثر الدم.

في بعض الأحيان يتم تحديد فهرس تنشيط جهة الاتصال أيضًا. يحدد هذا المؤشر نسبة زمن التخثر في الأنابيب المصنوعة من السيليكون وغير السيليكون وتتراوح عادة من 1.7 إلى 3.0.

من الممكن زيادة مؤشر تنشيط الاتصال في حالة ضعف وظائف الكبد أو تناول كميات كبيرة من مضادات التخثر أو تعطيل أجزاء معينة من الإرقاء.

وقت إعادة حساب البلازما

يشير وقت إعادة حساب البلازما إلى الفترة الزمنية اللازمة لتكوين الجلطة بعد إضافة أملاح الكالسيوم. يعتبر النطاق من دقيقة إلى دقيقتين أمرًا طبيعيًا.

تمت أيضًا دراسة زمن إعادة الحساب المنشط (زمن الكاولين أو مؤشر AVR). تختلف هذه المعلمة عن المعلمة السابقة في منهجية التحليل. معيار AVR هو 50-70 ثانية.

من الممكن تمديد وقت إعادة الحساب من خلال:

• نقص بعض عوامل تخثر الدم
• أمراض الصفائح الدموية
• مستويات مفرطة من مضادات التخثر

يعد الانخفاض في وقت إعادة الحساب علامة على زيادة نشاط نظام التخثر.

تنشيط وقت تجلط الدم الجزئي

يُطلق على هذا المؤشر أيضًا اسم APTT أو APTT أو وقت الكاولين-كيفالين. يستخدم هذا الاختبار لتحديد وظيفة عوامل تخثر البلازما.

APTT العادي هو 35-45 ثانية.

يمكن ملاحظة زيادة في aPTT لأكثر من 45 ثانية من خلال:

• فرفرية نقص الصفيحات الأساسية
• الهيموفيليا
• الإفراط في تناول مضادات التخثر
• متلازمة مدينة دبي للإنترنت
• بعض أمراض الكبد

قد يكون الانخفاض في مستوى aPTT (أقل من 35 ثانية) علامة على استخدام تقنية غير مناسبة لأخذ عينات الدم للتحليل أو زيادة تخثر الدم.

تراجع جلطة الدم

يستخدم هذا المؤشر لقياس كثافة الجلطة المتكونة أثناء تخثر الدم.

جوهر الطريقة هو السماح للدم بالتجلط، ثم يتم تقييم النسبة بين الجزء السائل بعد تكوين جلطة دموية والحجم الأولي للدم المأخوذ للتحليل.

عندما يتم تحديده بالطريقة القياسية، يكون تراجع جلطة الدم في حدود 45-65٪.

من الممكن حدوث انخفاض في معدل التراجع في الحالات التالية:

• انخفاض عدد الصفائح الدموية
• زيادة عدد خلايا الدم الحمراء
• بعض الأمراض الوراثية

تحدث زيادة تراجع الجلطة مع فقر الدم وزيادة كمية الفيبرينوجين في الدم.

تصوير التخثر والتخثر

في بعض المختبرات، يتم تحديد نشاط نظام تخثر الدم ليس عن طريق اختبارات التخثر القياسية، ولكن بمساعدة أجهزة خاصة (تجلط الدم أو تجلط الدم) التي تجعل من الممكن الحصول على صورة بيانية لعمليات تخثر الدم.

يسمح تحليل مثل هذه الصورة (مع مراعاة تقنيات التسجيل المناسبة) بإجراء تقييم أكثر دقة للإرقاء.

باستخدام تخطيط التجلط الدموي، يتم تحديد مدة المراحل الثلاث الرئيسية لتخثر الدم وبعض المؤشرات المحددة.

يعد تصوير التخثر طريقة محددة للغاية يمكنك من خلالها تحديد مدة عمليات التخثر الفردية.

مخطط التخثر الذاتي

يعد اختبار التخثر الذاتي أو اختبار التخثر الذاتي أسلوبًا نادرًا ما يستخدم لدراسة نظام التخثر.

ولإجراء التحليل، تتم إضافة كاشف محدد إلى الدم المعالج خصيصًا على فترات منتظمة لمدة ساعة، لتحديد تخثر الدم في كل مرة. وبناء على البيانات التي تم الحصول عليها، يتم رسم الرسم البياني. يصور هذا الرسم البياني العلاقة والتوازن بين أنظمة التخثر ومنع تخثر الدم في الدم.

عند استخدام الطريقة المختصرة، يتم إجراء الاختبار خلال عشر دقائق.

في أغلب الأحيان، يتم استخدام طريقة إنشاء وتحليل مخطط التخثر الذاتي للاستخدام طويل الأمد للهيبارين أو لتشخيص الهيموفيليا.